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不同樣本保存液的成本及性能對(duì)比分析

更新時(shí)間:2024-01-31      點(diǎn)擊次數(shù):2482
隨著疫情的發(fā)展,核酸檢測也百花齊放,門檻越來越低,各種產(chǎn)品參差不齊,價(jià)格也有高有低,這些產(chǎn)品在性能上有它們的差距嗎?是否只是存在價(jià)格上的差異,有些產(chǎn)品甚至性能還不如單純的PBS(磷酸鹽緩沖液)?到底異硫氰酸胍和鹽酸胍存在哪些區(qū)別?

下面,我們來做詳細(xì)說明:

滅活型樣本保存液主要成分有緩沖液、表面活性劑、胍鹽、穩(wěn)定劑和絡(luò)合劑以及PH調(diào)節(jié)劑等成分組成。

樣品保存液

 


緩沖液的作用是穩(wěn)定PH值;表面活性劑和胍鹽是蛋白變性劑,有著各自不同的作用;胍鹽具有的光和熱的不穩(wěn)定性,穩(wěn)定劑是不可少的;絡(luò)合劑可以絡(luò)合金屬離子,避免金屬離子對(duì)PCR熒光擴(kuò)增的干擾;PH調(diào)節(jié)劑作為調(diào)整PH值的主要成分,作用也是至關(guān)重要的。

不同PH值顏色差異,與其他物質(zhì)及含量無關(guān)。緩沖液和PH調(diào)節(jié)劑可以讓保存液穩(wěn)定在一個(gè)弱酸或者弱堿的范圍,這個(gè)時(shí)候保存液是黃色或者橙紅色,采樣拭子浸泡后,隨著拭子上酸性膠的溶解,采樣后的試管內(nèi)保存液呈黃色,偏酸性。為什么保存樣本的保存液要呈弱酸性呢?因?yàn)椴《镜暮怂崾荝NA,單螺旋結(jié)構(gòu),在弱酸性條件下更穩(wěn)定,對(duì)應(yīng)的,DNA為雙螺旋結(jié)構(gòu),在弱堿性條件下更穩(wěn)定。

市場上,我們看到很多保存液呈粉紫色,其PH值在8.5以上,采樣后仍呈粉紅色,說明PH偏高,是非常不利于病毒核酸樣本保存的。

胍鹽作為一種強(qiáng)蛋白變性劑,是裂解的主要成分,高濃度的胍鹽能夠抑制Rnase的活性,是防止核酸降解的主要成分,這也是我們一貫強(qiáng)調(diào)胍鹽濃度的主要原因。那么鹽酸胍和異硫氰酸胍有什么區(qū)別呢?通常認(rèn)為,鹽酸胍和尿素等蛋白變性劑對(duì)蛋白變性的可能是可逆的,鹽酸胍對(duì)疏水氨基酸殘基的增溶作用。因?yàn)辂}酸胍具有形成氫鍵的能力,鹽酸胍在高濃度(4~8mol/L)水溶液時(shí),可以破壞水的氫鍵結(jié)構(gòu),鹽酸胍就成為非極性殘基的較好溶劑,使之蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的疏水殘基伸展和溶解性增加,從而使蛋白質(zhì)發(fā)生不同程度的變性。在蛋白變性速度上,鹽酸胍是明顯慢于異硫氰酸胍的,另外,鹽酸胍的穩(wěn)定性也差很多,因此,鹽酸胍產(chǎn)品的有效期會(huì)短很多,這在大面積的核酸篩查中不明顯,一旦庫存放置時(shí)間較久,產(chǎn)品性能就會(huì)出現(xiàn)大幅度下降,甚至不符合要求。

表面活性劑的變性效果表現(xiàn)在溶解膜蛋白、破裂細(xì)胞、釋放核酸,還具有一定的去污、助溶能力等方面。因此,沒有表面活性劑的無泡產(chǎn)品,不僅核酸釋放率會(huì)較低,還會(huì)存在滅活速度慢,滅活不*等情況。病毒樣本存在傳染性的可能。

候保存液是黃色或者橙紅色,采樣拭子浸泡后,隨著拭子上酸性膠的溶解,采樣后的試管內(nèi)保存液呈黃色,偏酸性。為什么保存樣本的保存液要呈弱酸性呢?因?yàn)椴《镜暮怂崾荝NA,單螺旋結(jié)構(gòu),在弱酸性條件下更穩(wěn)定,對(duì)應(yīng)的,DNA為雙螺旋結(jié)構(gòu),在弱堿性條件下更穩(wěn)定。

市場上,我們看到很多保存液呈粉紫色,其PH值在8.5以上,采樣后仍呈粉紅色,說明PH偏高,是非常不利于病毒核酸樣本保存的。

胍鹽作為一種強(qiáng)蛋白變性劑,是裂解的主要成分,高濃度的胍鹽能夠抑制Rnase的活性,是防止核酸降解的主要成分,這也是我們一貫強(qiáng)調(diào)胍鹽濃度的主要原因。那么鹽酸胍和異硫氰酸胍有什么區(qū)別呢?通常認(rèn)為,鹽酸胍和尿素等蛋白變性劑對(duì)蛋白變性的可能是可逆的,鹽酸胍對(duì)疏水氨基酸殘基的增溶作用。因?yàn)辂}酸胍具有形成氫鍵的能力,鹽酸胍在高濃度(4~8mol/L)水溶液時(shí),可以破壞水的氫鍵結(jié)構(gòu),鹽酸胍就成為非極性殘基的較好溶劑,使之蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的疏水殘基伸展和溶解性增加,從而使蛋白質(zhì)發(fā)生不同程度的變性。在蛋白變性速度上,鹽酸胍是明顯慢于異硫氰酸胍的,另外,鹽酸胍的穩(wěn)定性也差很多,因此,鹽酸胍產(chǎn)品的有效期會(huì)短很多,這在大面積的核酸篩查中不明顯,一旦庫存放置時(shí)間較久,產(chǎn)品性能就會(huì)出現(xiàn)大幅度下降,甚至不符合要求。

表面活性劑的變性效果表現(xiàn)在溶解膜蛋白、破裂細(xì)胞、釋放核酸,還具有一定的去污、助溶能力等方面。因此,沒有表面活性劑的無泡產(chǎn)品,不僅核酸釋放率會(huì)較低,還會(huì)存在滅活速度慢,滅活不*等情況。病毒樣本存在傳染性的可能。穩(wěn)定劑成本較高,但是可以有效的保持胍鹽的穩(wěn)定性,因此也是不可少的成分。

目前市場上的絕大部分低價(jià)產(chǎn)品,主要通過降低胍鹽含量、用鹽酸胍替代異硫氰酸胍、不添加穩(wěn)定劑等方法來降低成本。
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