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水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-08-29      點(diǎn)擊次數(shù):2149
   水平電泳槽是用來對少量核酸樣品進(jìn)行快速瓊脂糖電泳的裝置,制膠可在多用制膠器的膠槽中完成(無需膠布封口)。配備的多用途制膠器可以灌制60×60㎜的小膠、120×60mm的寬膠,還可以灌制60×120㎜的長膠,以及120×120㎜的大方膠。本電泳槽還配有8種不同齒數(shù)和厚度的梳子供選擇,樣品能量:2、3、6、8、11、13、18、25齒,標(biāo)準(zhǔn)梳和各種制備梳。灌制好的各種大小的瓊脂糖凝膠均可以放入水平電泳槽的平臺(tái)上進(jìn)行電泳,做到槽多用,可節(jié)省實(shí)驗(yàn)空間和實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
 
  水平電泳槽的使用步驟及使用注意事項(xiàng):
  一、電泳槽制膠步驟
  1、將瓊脂糖放在濾水浴或電磁攪拌器、微波爐中加熱至*溶化,然后冷卻至55℃左右,加入適當(dāng)濃度的EB染料。
  2、將凝膠托盤放入配套的制膠盒中,或選用膠布封住托盤兩端,倒入冷卻后的瓊脂糖溶液。
  3、制膠前可根據(jù)所需凝膠的大小插入隔板,制膠前先用少許膠把隔板與托盤底部的縫隙封住,待凝固后再倒入凝膠。
  4、根據(jù)需要插入加樣梳,在室溫下待瓊脂糖自然凝固。
 
  二、電泳槽電泳步驟
  1、瓊脂糖凝固后,輕輕拔出加樣梳,并將托盤從制膠盒,制膠器中取出或撕下膠布,移入電泳槽。
  2、凝膠梳井端應(yīng)在負(fù)極,在電泳槽中注入緩沖液,使緩沖液液面沒過凝膠即可。
  3、用微量取樣器在梳井中加樣,依據(jù)極性蓋緊上蓋,連接電泳儀,選擇合適的電泳條件,開始電泳。
 
  水平電泳槽的使用主要事項(xiàng):
  1.不允許將EB染色液加入電泳槽中,必須在電泳結(jié)束后且在染色區(qū)內(nèi)進(jìn)行染色。
  2.正負(fù)級(jí)分不清楚,造成樣品跑入緩沖液。黑色為負(fù)極,紅色為正極,樣品由負(fù)極往正極跑,需在靠近負(fù)極一端加樣。
  3.加樣的時(shí)候,不能將槍頭插得太深,避免膠塊被穿透。
  4.必須按照要求的濃度對膠的濃度進(jìn)行制備,不然,小分子物質(zhì)會(huì)從膠塊中跑出。
  5.若沒有經(jīng)驗(yàn),Z好定時(shí),不然樣品可能因?yàn)槭韬鰪哪z塊中跑出
  6.樣品必須在上樣緩沖液中*溶解,不然在凝膠中不能移動(dòng)。采用同種緩沖液制膠和電泳,點(diǎn)樣必須在緩沖液加到凝膠之上以后。
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